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培养基不凝固怎么办?凝固物质又有哪些?
阅读次数:1464 发布时间:2022/10/9 9:40:10
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你知道培养基的凝固物质有哪些吗?跟着远慕生物来学习一下吧!

常用的凝固物质为琼脂,特殊情况下也可用明胶、卵白蛋白、血清等。

抑制剂和指示剂:用于选择、鉴定及判断结果。

1.抑制剂:必须具有选择抑制作用。目的在于抑制非检出菌(非目的菌)的生长,以利于检出菌(目的菌)的生长。常用胆盐、煌绿、亚硫酸钠、亚硒/酸钠及一些染料和某些抗生素等。

2.指示剂:在培养基中加入一定种类的指示剂,是为了观察细菌是否利用和分解培养基中的糖、醇类。常用的有酚红、中性红、甲基红、溴甲酚紫、溴麝香草酚蓝、中国蓝等酸碱指示剂。亚甲蓝常用作氧化还原指示剂。

培养基不能凝固的原因

①培养基制备过程中过度加热

②低pH值造成培养基酸解

③琼脂使用量不正确

④琼脂未完/全溶解

⑤培养基成分未充分混匀

培养基的使用

1.琼脂培养基的融化

将培养基放到沸水浴中或采用其他有相同效果的方法(如高压锅中的蒸汽)融化。经过高压灭菌的培养基尽量减少重新加热的时间,避免过度加热。培养基融化后立即移开,室温静置片刻(约2min),以免玻璃容器发生破裂。

融化后的培养基放入47℃~50℃恒温水浴锅中保温,冷却到47℃~50℃所需的时间取决于培养基的类型、体积和在水锅里的分装量。融化后内培养基应尽快使用,放置时间一般不超过4h。剩余的培养基固后不得再次融化使用。特别是灵敏性培养基,应根据相关标准,缩短融化后放置的时间。

将琼脂培养基倒入类似检测培养使用的独立容器中,插入温度计,记录并保存琼脂的融化温度。

加入样品的培养基应将温度调节到44℃~47℃,或按照相关标准调节温度。

2.培养基的脱气

必要时,在使用将养基放到沸水浴或蒸汽浴中加热15min,加热时松开容器盖子;加热后盖紧盖子,并迅速冷却至使用温度。

3.添加成分的加入

对热不稳定的添加成分应在培养基冷却至47℃~50℃时加入,灭菌的添加成分加入应冷却至室温,避免冷的液体会造成琼脂凝胶或形成片状物。将添加成分慢加入培养基并充分混匀,尽快分装到待用的容器中。

4.培养基的弃置

所有污染和未使用的培养基的弃置应采用安全的方式,并符合相关法律法规的规定。

原创作者:上海远慕生物科技有限公司

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