一、用途

本产品主要适用于组织切片及脱落细胞染色。

二、原理

      核酸等电点为PH1.5-2.0,当PH＞2.0时，能结合带正电荷的苏木素。染料中的伊红、亮绿、橙黄等为酸性染料，俾士麦棕为盐基性染料，能与细胞浆中相反电荷的蛋白质结合，从而染出鲜艳的结构。

三、试剂盒组成

①、 苏木素染色液：1×250ml；　　  ②、5%盐酸液：1×25ml；  

    ③、饱和碳酸锂：1×5ml；　　　　　④、橙黄G-6染色液：1×250ml；

    ⑤、亮绿染色液：1×100ml；　　　　⑥、俾士麦棕染色液：1× 22ml；

⑦、伊红染色液：1×100ml；　　　  ⑧、5%磷钨酸：1× 10ml。

用户须自备95%酒精、无水酒精、二甲苯、树胶。

EA-36染色液配制：临用前将亮绿染色液100ml、俾士麦棕染色液22ml、伊红染色液100ml混匀，边搅拌边加入5%磷钨酸10ml，充分混匀后即为EA-36染色液。注意：此液配成后*佳使用期为1－2个月，每次使用亦应搅拌均匀。

0.5%稀盐酸液配制：取5%盐酸液25ml加水至250ml, 混匀即可。

稀碳酸锂液配制：在250 ml蒸馏水中加入饱和碳酸锂6滴，混匀即可。

梯度酒精液配制：80%酒精液：95%酒精84 ml、蒸馏水16 ml混匀；

70%酒精液：95%酒精74 ml、蒸馏水26 ml混匀；

50%酒精液：95%酒精53 ml、蒸馏水47 ml混匀。

四、染色方法

1、将未干的涂片置95%酒精中，固定15－30分钟。

2、加水：将已固定的涂片依次置80%、70%、50%酒精、蒸馏水中各1分钟。

3、染核：置苏木素染色液中2－10分钟（视温度酌情调整），蒸馏水冲净。

4、分色：置0.5%稀盐酸液中数秒，以涂片转成淡红色为度，立即以蒸馏水冲净。

5、蓝化：置稀碳酸锂液中约1分钟，以涂片转成蓝色为度，以蒸馏水冲净。

6、脱水：依次置50%、70%、80%酒精液中半分钟，再置95%酒精液中2分钟。

7、染浆：置橙黄G-6染色液中2分钟，再置95%酒精液中迅速洗涤2－3次，以去掉多余的橙黄G-6。

8、再染浆：置EA-36染色液中2－5分钟，再置两缸95%酒精液中分别洗涤1－2次。

9、去水：置两缸无水酒精中分别洗涤1－2次。

10、透明：置两缸二甲苯中分别洗涤1－2次。

11、封片：用树胶封固涂片。若不需保存标本，此步可略。

五、结果

上皮细胞：核染蓝紫色，核仁红色，胞浆依分化高低，分别染成橙黄、粉红、绿色、淡蓝色。

六、贮存、有效期　　　

本试剂盒应置2－25℃、相对湿度40－75%处避光保存,有效期一年。　

原创作者：上海远慕生物科技有限公司