传统分光光度计:
1、样品体积要求大,绝大部分要50μL以上
2、需使用比色皿
3、每次换样品时,比色杯需要清洗,工作繁重
4、光程一般为10mm,样品需要稀释,测量浓度范围小
5、灯源一般由氘灯(紫外)和钨灯(可见)组成,寿命短
6、需要预热半个小时以上
7、显示吸光度值,不显示浓度值
8、仪器体积大,质量重
微量分光光度计:
1:所需样品体积小,仅需1~2μL
2:不需要比色皿,用移液枪直接将样品滴加到检测平台上,测量时样品会自动形成液柱
3:只需用干净的吸水纸将样品从检测平台上擦拭干净即可
4:具有1mm和0.2mm两个光程(由电磁阀调节),样品无需稀释,测量范围可达到常规分光光度计的50倍
5:氙气闪光灯为灯源,寿命长,性能稳定
6:不需要预热,可随时检测
7:显示吸光度值的同时,程序直接给出浓度值(核酸、蛋白和荧光染料)
8:体积小(21cm×17cm×11cm ),质量轻(1.35kg)
常见分光光度计种类及区别
分光光度计是一种分析测量光谱的仪器,因为应用需求的不同,分光光度计有着不同的种类。分光光度计按照波长及应用域的不同可以分为:
(1)可见光分光光度计
(2)紫外分光光度计
(3)红外分光光度计
(4)荧光分光光度计
(5)原子吸收分光光度计。
现生命科学域比较流行的超微量分光光度计是属于紫外分光光度计的一种。
(1)可见分光光度计
用来测量待测物质对可见光(400~760nm)的吸光度并进行定量分析的仪器,称为可见分光光度计。可在600nm测定细菌细胞密度。
(2)
紫外可见分光光度计紫外可见分光光度计用来测量待测物质对可见光或紫外光(200~760nm)的吸光度并进行定量分析的仪器。可以测定核酸和蛋白的浓度,也可以测定细菌细胞密度。紫外分光光度计又可分为单光束,假双光束,双光束。它们的用途又有区别。
a) 单光束:适于在给定波长处测量吸光度或透光度,一般不能作全波段光谱扫描,要求光源和检测器具有很高的稳定性。
b) 双光束:自动记录,快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响,特别适合于结构分析。仪器复杂,价格较高。
c) 假双光束也就是比例双光束,它的原理是由同一单色器发出的光被分成两束,一束直接到达检测器,另一束通过样品后到达另一个检测器。这种仪器的优点是可以监测光源变化带来的误差,但是并不能消除参比造成的影响。
(3)红外分光光度计
一般的红外光谱是指大于760nm的红外光谱,这是研究有机化合物常用的光谱区域,能分析各种状态(气、液、固)的试样。
红外光谱法的特点是:快速、样品量少(几微克-几毫克),特征性强(各种物质有其特定的红外光谱图)、能分析各种状态(气、液、固)的试样以及不破坏样品。
(4)荧光分光光度计
荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。应用于科研、化工、医药、生化、环保以及临床检验、食品检验、教学实验等域。
通过对这些参数的测定, 不但可以做一般的定量分析, 而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化,从而阐明分子结构与功能之间的关系。
(5)原子吸收分光光度计
该法主要适用样品中微量及痕量组分分析常规仪器。是材料分析及质量控制部门进行常量、微量金属(半金属)元素分析的有力工具。
以上几种常见的分光光度计种类区别便是本文为大家介绍的内容,希望大家能够在了解之后更好的运用分光光度计。
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