elisa试剂盒*新实验测定标本分解 (1)标本溶血
由于各种人为原因引起的标本溶血,均可因红
细胞破坏溶解时释放出大量具有过氧化物酶活性的血红
蛋白,在以辣根过氧化物酶为标记的ELISA测定中,会导致非特异性显色,
ELISA试剂盒干扰测定结果。为克服上述干扰作用,标本采集时必须注意避免溶血。
(2)标本受细菌污染
因菌体中可能含有内源性辣根过氧化物酶,因此,被细菌污染的标本同溶血标本一样,亦可产生非特异性显色而干扰测定结果。ELISA试剂盒
(3)标本保存不当
在冰箱中保存过久的标本,血清中IgG可聚合成多聚体、AFP可形成二聚体,在间接法ELISA测定中会导致本底过深、甚至造成假阳性;标本放置时间过长(如一天以上),有时抗原或
抗体免疫活性减弱,亦可出现假阴性。为克服上述干扰,ELISA测定的血清标本宜为新鲜采集;如不能立即测定,5天内测定的血清标本可存放于4℃,ELISA试剂盒1周后测定的血清标本应低温冻存;冻存后融解的标本,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混合后再测定,但混匀时应轻柔,不可强烈振荡。
(4)标本凝集不全
在没有促凝剂和抗凝剂存在的情况下,正常血液采集后1/2~2h开始凝固,18~24h完全凝固。临床检验工作中,有时为了争取时间快速检测,常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清,此时的血清中仍残留部分纤维蛋白原,在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块,易造成假阳性结果;这类情况于次日复查时因血凝已完全,血清中不再有纤维蛋白原存在,故复查结果变为阴性。为避免上述干扰作用,解决的办法是血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清,或标本采集时用带分离胶的采血管或于采血管中加入适当的促凝剂。
(5)标本管中添加物质的影响
抗凝剂(如肝素,EDTA)、酶抑制剂(如NaN3可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性)及快速分离血清的分离胶等均对ELISA测定有一定干扰作用。
通过以上的分析和总结,临床检验
ELISA测定中出现假阳性或假阴性等错误的结果,排除
ELISA试剂盒因素和操作因素,再有就是从标本因素进行分析,并应采取相应措施排除干扰,从而确保检测结果的准确性。
原创作者:上海远慕生物科技有限公司