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抗坏血酸(Vc)测试盒说明书
阅读次数:696 发布时间:2016/5/10 11:10:57
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抗坏血酸(Vc)测试盒说明书

一、试剂盒组成及配置(50T/48样)

   试剂一:贮备液5mlx1瓶,4℃保存6个月。
   试剂一应用液配制:用时按照试剂一贮备液:双蒸水=1:14稀释,混匀制备
   试剂二:粉剂x1支,4℃保存6个月。
   试剂二应用液配制:用时一支粉剂加0.36ml冰醋酸再加水至40ml,溶解,4℃保存。
   试剂三:白色结晶体粉剂x1支,4℃保存6个月。
   试剂三应用液配制:因胶南溶解,用前2-4小时加95%乙醇或无水乙醇60ml充分溶解,制备,4℃保存。
   试剂四:黄色贮备液0.2mlx1瓶,冰箱4-8℃避光保存,贮存时间6个月。
   试剂四应用液配制:用时取0.15ml试剂贮备液加水至25ml制备。现用现配
   试剂五:液体6mlx1瓶,4℃保存6个月。
   试剂六:Vc标准品:粉剂6mgx3支,每瓶内含维生素C,4℃保存6个月。60ug/ml Vc标准品应用液的配制:将1支标准品粉剂溶于10ml试剂一应用液中,制备。6ug/ml Vc标准品应用的配制:取60ug/ml Vc标准品应用液再用试剂一应用液10倍稀释备用,现用现配。

注:维生素C标准品易氧化,因此在样本上清液制备好后在配标准,并在10分钟内进行检测。     
                                                                                         
二、操作过程
   1、上清液制备:取样本0.15ml加1号试剂0.45ml,旋涡混匀,放置15分钟后离心,3500~4000转/分,离心10分钟,上层清亮液体为上清液。

   2、上清液中Vc的测定:

 
空白管
标准管
测定管
试剂一(mL)
0.4
 
 
6ug/ml Vc标准应用液(ml)
 
0.4
 
上清液(ml)
 
 
0.4
试剂二应用液(ml)
0.5
0.5
0.5
试剂三(ml)
1
1
1
试剂四(ml)
0.25
0.25
0.25
充分混匀,37℃水浴30分钟
试剂五
0.1
0.1
0.1
充分混匀,静置10分钟,波长636nm,1cm或者0.5cm光径,双蒸水凋零,测定各管吸光度值。

原创作者:上海远慕生物科技有限公司

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