远慕生物试剂盒提取植物dna步骤试剂盒提取植物dna已经获得广泛应用。各个生化试剂厂家也都有了dna提取试剂盒产品。远慕作为国内知名生化试剂供应商提供了各类
dna提取试剂盒。今天给大家介绍试剂盒提取植物dna步骤。当然是以远慕植物基因组dna提取试剂盒产品为例。
使用前先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式
离心机在室温下离心。
1、植物组织预处理:取新鲜植物组织(不超过 100mg)或干重组织(不超过 20mg),于液氮中充分研磨至细粉状,让液氮自然挥发。
2、将研磨好的植物组织粉末迅速转移到预先装有 400ul
溶液 A、20ul RNase A(10mg/ml)和 5ul β-巯基乙醇的离心管中,充分颠倒混匀,室温放置 10min。
3、加入 140ul 溶液 B,充分颠倒混匀,12000rpm 离心 10min,将上清转移至新离心管(约 400-500ul),注意不要吸入沉淀。
4、加入和上清相同体积的溶液 C,充分颠倒混匀,再加入和溶液 C 相同体积的无水乙醇,此时若出现絮状物,将絮状物吹散后一起加入吸附柱中,12000rpm 离心 5min,弃废液,一次加不完可分两次加入。
注意:如果吸附柱膜呈绿色或离心时有堵塞现象,可向吸附柱中加入 600ul 无水乙醇,并适当延长离心时间。
5、 向吸附柱中加入 600ul 漂洗液(请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm 离心 1min,弃废液,将吸附柱放回收集管。
6、向吸附柱中加入 600ul 漂洗液,12000rpm 离心 1min,弃废液,将吸附柱放回收集管中, 12000rpm 离心 2min。
7、将吸附柱置于室温或 50℃温箱放置数分钟,否则残余的乙醇可能会影响后续的实验如酶切、PCR 等。
8、将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜中央悬空滴加 50-200ul 经 65℃水浴预热的洗脱液,室温放置1-5min,12000rpm 离心 2min,即可得到高质量的植物基因组 DNA。
9、(可选)离心所得洗脱液再加入吸附柱中,室温放置 2min,12000rpm 离心 2min。
以上是上海远慕生物植物基因组dna提取试剂盒使用步骤。如果还有不理解可以联系远慕技术支持部分获取帮助。
原创作者:上海远慕生物科技有限公司