钙黄绿素溶液配制方法说明

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钙黄绿素是一种激发光波长在495nm处，发射光波长在515nm处的钙离子荧光指示剂。，因为它的细胞毒性很低，所以钙黄绿素常作为荧光探针去染活细胞的。

钙黄绿素溶液配制

称取0.2g射香草酚酞,1g钙黄绿素及100g在玻璃研钵中研细混匀。

钙黄绿素溶液染色原理

钙黄绿素在其浓度大于100 mM时，钙黄绿色荧光自我淬灭。它常被用做络合物指示剂，用来滴定EDTA螯合的钙离子，并且用荧光检测法测定钙离子浓度。它具有非常好的水溶性，其质子解离常数（酸度系数）pKa1=2。1， pKa2=2。9， pKa3=4。2， pKa4=5。5， pKa5=10。8和pKa6=11。7。Calcein-AM是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂，Calcein-AM由于在Calcein（钙黄绿素）的基础上加强了疏水性，因此能够轻易穿透活细胞膜。当其进入到细胞质后，酯酶会将其水解为Calcein（钙黄绿素）留在细胞内，发出强绿色荧光。

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