真菌的DNA和RNA提取方法

    搞真菌基因功能研究的不可避免的总要涉及到DNA和RNA提取，由于真菌中有较多的多糖成分影响到所提DNA和RNA的质量和后续的分析。因此一个高质量的、实惠的提取方法是我们的优先选择，在此分享一下我一直在用的提取方法，供大家参考。

    真菌DNA的提取（方法一）

    1.取真菌菌丝0.5g,在液氮中迅速研磨成粉

    2.加入4mL提取液，快速振荡混匀

    3.加入等体积的4mL的:异戊醇（24:1），涡旋3～5min（此处是粗提没有加酚，可以节约成本的哟！）

    4.1000rpm，4℃，5min

    5.上清用体积的:异戊醇（24:1）再抽提一次（10,000rpm，4℃离心5min）

    6.取上清，加入2/3倍体积的-20℃预冷异丙醇或2.5倍体积的无水乙醇沉淀,混匀,静置约30min

    7.用毛细玻棒挑出絮状沉淀,用75%乙醇反复漂洗数次,再用无水乙醇漂洗1次,吹干，重悬于500ulTE中

    8.加入1ulRNaseA（10mg/mL），37℃处理1hr

    9.用酚（pH8.0）::异戊醇（25:24:1）和:异戊醇（24:1）各抽提1次（10,000rpm，4℃离心5min）

    10.取上清，1/10V3MNaAc,2.5V体积的无水乙醇,-70℃沉淀30min以上

    11.沉淀用75%乙醇漂洗，风干,溶于200ulTE中，-20℃保存备用

     真菌的DNA和RNA提取方法   远慕生物 生物试剂

原创作者：上海远慕生物科技有限公司