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上海远慕详解—肝素-琼脂糖凝胶说明书
阅读次数:877 发布时间:2016/9/30 10:58:37
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上海远慕详解—肝素-琼脂糖凝胶说明书


肝素-琼脂糖凝胶

1 简介 

肝素是一种含硫酸酯的酸性多糖,将它偶联到交联及活化的琼脂糖凝胶上,该填料具有很高的物理化学稳定性。 

肝素能和抗凝血因子Ⅲ、凝血因子、蛋白合成因子、脂蛋白、干扰素、核酸结合蛋白、限制内切酶、凝血酶及类凝血酶等生物大分子结合,所以肝素琼脂糖凝胶可以用于这类物质的纯化。 

本产品稳定性好,基团脱落少,使用寿命长,使用方便,应用广泛。 

2 亲和填料特性 

特点 

基团脱落少,结合特异性强 

基质 

6%的交联琼脂糖凝胶 

配基 

肝素 

配基密度 

5mg/ml 

吸附载量 

2-3mg 抗凝血因子Ⅲ(AT Ⅲ )/ml 

亲和填料的颗粒大小 

45-165μm 

流速 

300cm/h 

pH范围 

4-10,在位清洗时pH范围可到3-13 

使用温度 

4℃~常温 

保存温度 

+4~8℃ 

保存液体 

20%乙醇 

3 适用范围 

肝素琼脂糖凝胶用于抗凝血因子Ⅲ、凝血因子、蛋白合成因子、脂蛋白、干扰素、核酸结合蛋白、限制内切酶、凝血酶及类凝血酶等生物大分子的分离纯化。

4 亲和填料应用的注意事项: 

(1)该凝胶从冷室或冰箱中取出后在室温下缓慢振摇恢复到室温,然后再装柱,以免产生气泡影响柱效; 

(2)吸附:20-50mM,pH7.4-8.0的缓冲液,为避免离子交换的干扰,缓冲液中可以适当加50mM-100mM的NaCl,,*常用的为Tris-HCl缓冲液; 

(3)洗脱:可以用pH7.4-8.0的缓冲液加0.2-2M进行阶段或者线性洗脱;

(4)上样样品必须与平衡柱子的缓冲液的pH、电导相同; 

(5)不同的样品,吸附和洗脱方法不相同,可以根据相关的文献进行;

(6)肝素琼脂糖凝胶亲和填料的再生处理方法:先用0.1M Tris-HClpH7.0缓冲液洗3个柱床体积,然后用0.1M NaOH含2MNaCl流洗3个床体积,*后用20%乙醇洗 3个床体积即可。长时间用酸碱洗填料会是填料的吸附能力下降,所以清洗要尽量缩短时间; 

(7)该亲和填料保存条件为20%乙醇,4-8℃。 

原创作者:上海远慕生物科技有限公司

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