检测范围： 30pg/ml-900pg/ml

    使用目的：人转移因子（TF）试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中转移因子（TF）含量。

    实验原理

    本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人转移因子（TF）水平。用纯化的人转移因子（TF）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入转移因子（TF），再与HRP标记的转移因子（TF）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的转移因子（TF）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人转移因子（TF）浓度。    试剂盒组成

    1

    30倍浓缩洗涤液

    20ml×1瓶

    7

    终止液

    6ml×1瓶

    2

    酶标试剂

    6ml×1瓶

    8

    标准品（1600pg/ml）

    0.5ml×1瓶

    3

    酶标包被板

    12孔×8条

    9

    标准品稀释液

    1.5ml×1瓶

    4

    样品稀释液

    6ml×1瓶

    10

    说明书

    1份

    5

    显色剂A液

    6ml×1瓶

    11

    封板膜

    2张

    6

    显色剂B液

    6ml×1/瓶

    12

    密封袋

    1个

    标本要求

    1.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

    2.不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

    人转移因子（TF）试剂盒操作步骤

    1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

    800pg/ml

    5号标准品

    150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

    400pg/ml

    4号标准品

    150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

    200pg/ml

    3号标准品

    150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

    100pg/ml

    2号标准品

    150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

    50pg/ml

    1号标准品

    150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

    2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品*终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

    3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

    4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

    5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

    6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

    7.温育：操作同3。

    8.洗涤：操作同5。

    9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。

    10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

    11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

    人转移因子（TF）试剂盒注意事项

    1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

    2.浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

    3.各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

    4.请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请*后乘以总稀释倍数（×n×5）。

    5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

    6.底物请避光保存。

    7.严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。

    8.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

    9.本试剂不同批号组分不得混用。

    10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

    保存条件及有效期

    1.试剂盒保存：；2-8℃。

    2.有效期：6个月

原创作者：上海远慕生物科技有限公司