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上海远慕分享:无蛋白血滤液制备实验
阅读次数:1864 发布时间:2017/7/31 15:43:46
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上海远慕分享:无蛋白血滤液制备实验


    钨酸法

    实验原理:钨酸钠与硫酸混合,生成钨酸,钨酸可以与血液中蛋白质结合生成蛋白质盐沉淀,经离心将蛋白质除掉。

    三氯醋酸法

    实验原理:血液中蛋白质能与三氧醋酸作用于生成不溶性的蛋白质盐沉淀,经离心将蛋白质除去,上清液为无蛋白血滤液。

    实验步骤

    一、钨酸法

    实验试剂:

    1. 100g/L钨酸钠溶液:称取钨酸钠100g,溶于水中加水至1000ml

    2. 1/3M硫酸:取己标定的当量硫酸2份加水1份混合。

    实验操作:

    用吸管将全血缓慢放入蒸馏水中,每次加入试剂后充分混匀,静止10分钟后离心,取上清液备用。

    二、三氯醋酸法

    实验试剂:100 g/L三氯醋酸溶液

    实验操作:取血清或血浆一份,三氯醋酸9份,加入血清或血浆中(边加边摇)。充分混匀后离心,取上法备用。


    注意事项

    一、钨酸法

    1. 抗凝血中草酸盐过剩时,蛋白质沉淀不完全,沉淀不能变为暗褐色,此时可滴加100g/L硫酸一滴,摇匀,至沉淀变为暗褐色再进行过滤。

    2. 除蛋白滤液不透明时,应将蛋白质沉淀及滤液倾回试管,按1所示方法加人硫酸,使蛋白质完全沉淀。

    3. 此滤液适于葡萄糖、肌酐、肌酸、尿酸等测定。

    二、三氯醋酸法

    1. 此法所得滤液量多,酸性较强,适于较强酸性溶解的物质定测定,如钙。 磷等。

    2. 不适于碱性还原法血糖定量测定。

    3. 三氯醋酸易潮解,注意保存。

原创作者:上海远慕生物科技有限公司

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