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猪内皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)elisa试剂盒说明书,规格型号,价格,品牌,优点等资讯,本司专业经营进口/国产
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中文名:
猪内皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA试剂盒别名:猪内皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA Kit
供应商:上海远慕
规格:48t/96t
保存:2-8℃
有效期:6个月
标本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
使用范围:仅供科研使用,不得用于临床。
产品用途:用于测定人血清,血浆,组织及相关液体样本中的含量或活性。
本司ELISA试剂盒优点:
1.特异性强:不与其它细胞因子反应。
2.重复性好:板内、板间变异系数均小于10%。
3.稳定性高:实验效果很稳定。
4.超灵敏度:*小的检测浓度小于1号标准品,稀释度和样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
检测原理:
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被样本抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻 底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的样本呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
猪内皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA试剂盒组成:
1、包被抗-HBs反应条 1瓶
2、酶结合物 1瓶
3、HBsAg阳性对照 1瓶
4、HBsAg阴性对照 1瓶
5、洗涤液:用前每瓶作1:20稀释 1瓶
6、显色剂(TMB)A 1瓶
7、显色剂(TMB)B 1瓶
8、终止液 1瓶
猪内皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA试剂盒说明书操作方法:
1、加入待测标本每孔0.05ml,并设HBsAg阳性对照2孔,HBsAg阴性对照2孔,空白对照1孔,然后加入酶结合物每孔1滴(0.05ml、空白对照孔不加),充分混匀后置37℃孵育30分钟。
2、洗板:弃去反应条孔内液体、拍干、用洗涤液注满每孔,弃去拍干,反复五次后拍干。
3、显色剂:先加显色剂A每孔1滴(0.05ml),然后再加显色剂B每孔1滴(0.05ml),混匀,37℃孵育10分钟。
4、每孔加终止液1滴(0.05ml),混匀。
ELISA试剂盒结果:
比色法:波长450nm,先用空白孔校零点,然后读取各孔光密度值。
样品OD值/阴性对照平均OD值≥ 2.1判断为阳性,否则为阴性。
备注:阴性对照平均OD值低于0.05作0.05计算,高于0.05按实际OD值计算。阳性对照OD值≥0.8,实验结果有效。
猪内皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA检测试剂盒说明:
1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中,英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
猪内皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA试剂盒说明书液体类标本:
包括血清,血浆,尿液,胸腹水,脑脊液,
细胞培养上清等。
1. 血清:
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
2. 血浆:
应根据标本的要求选择EDTA,柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
3. 尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水,脑脊液参照此实行。
4. 细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
5. 培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
猪内皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA Kit注意事项:
1、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。
2、酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。
3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。
4、牢记样本已经稀释5倍,计算结果乘以5才是样本实际浓度。
5、本试剂盒定量范围为50-1600pg/mL,超过此范围,为标准曲线延伸计算所得,不做为准确定量结果,请用标准品稀释液稀释后测定准确结果(50-1600pg/mL范围内),乘以总稀释倍数即为样本*终浓度。
6、若显色过浅,可适当延长底物温育时间。
7、为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头;酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰到微孔;不得重复使用封板膜。
8、试剂盒保质期内使用,不同批号的试剂不得混用。
9、底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
原创作者:上海远慕生物科技有限公司