上海远慕生物科技详细介绍大鼠Ⅲ型前胶原C端肽(PⅢCP)ELISA检测试剂盒说明书，价格，型号，规格，用途，特点，注意事项，适用范围等详情，乔羽生物专业供应进口/国产elisa试剂盒，动物血清，标准品，培养基，抗体，染色液，实验耗材，化学试剂，其他科研试剂，提供ELISA试剂盒免费代测服务，一 周内出结果，ELISA种属涵盖了科研实验所需的动植物，了解更多种属详情请来电！

中文名：大鼠Ⅲ型前胶原C端肽(PⅢCP)ELISA试剂盒
别名：大鼠Ⅲ型前胶原C端肽(PⅢCP)ELISA Kit
供应商：上海远慕
规格：48t/96t
保存：2-8℃
有效期：6个月
特点：敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存，操作简便。
用途：用于测定血清，血浆及相关液体样本中相关含量或活性。
检测种属：大小鼠、人、豚鼠、兔子、猪、犬、牛羊、鸡鸭ELISA试剂盒等种属。
常见ELISA试剂盒：白介素、选择素、集落刺激因子、肿瘤坏死因子、干扰素、转化生长因子、趋化因子、细胞因子受体、粘附分子、生长因子、凋亡因子等等。
适用范围：仅用于科研实验，禁用于临床。

大鼠Ⅲ型前胶原C端肽(PⅢCP)ELISA试剂盒优双抗体夹心法(检测未知抗原);
1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次。
2、加样：加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。
3、加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。
4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。
5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

大鼠Ⅲ型前胶原C端肽(PⅢCP)ELISA试剂盒优样品收集、处理及保存方法：
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

大鼠Ⅲ型前胶原C端肽(PⅢCP)ELISA检测试剂盒说明书注意事项：   
1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。   
2.试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。   
3.使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。   
4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。   
5.洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。   
6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。   
7.加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。   
8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。   
9.底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

大鼠Ⅲ型前胶原C端肽(PⅢCP)ELISA检测试剂盒说明书组成：
1：预包被板: 96T/48T
2：酶标记抗体: (30倍浓缩)HRPIgG,亲合纯化 0.4mL x 1
3：标准品: -6 0.5mL x 2
4：EIA缓冲液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 30mL x 1
5：标记抗体稀释液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 12mL x 1
6：显色剂: TMB底物液 15mL x 1
7：终止液: 1N硫酸 12mL x 1
8：浓缩洗涤液: (40倍浓缩) 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 50mL x 1

大鼠Ⅲ型前胶原C端肽(PⅢCP)ELISA试剂盒操作步骤：
（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，*终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。

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