中文名：植物赤霉素（GA）elisa试剂盒

    别名：植物赤霉素（GA）ELISA Kit

    供应商：上海远慕

    规格：48t/96t

    保存：2-8℃低温保存

    有效期：6个月

    适用范围：仅限科研实验，不作临床使用。

    用途：用于测定血清，血浆及相关液体样本中相关含量或活性。

    特点：敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存，操作简便。

    特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的，且与其他相关蛋白无交叉反应。

    植物赤霉素（GA）ELISA检测试剂盒预期应用：ELISA法定量测定血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。


 

    ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作中有一定的技术要求，在检测过程中除正常反应外，有时常见到一些错误的结果。

    引起ELISA测定错误结果的原因主要有：

    ①标本因素；

    ②试剂因素；

    ③操作因素。

    植物赤霉素（GA）ELISA检测试剂盒试剂组成

    植物赤霉素（GA）ELISA试剂盒若干特点：

    专一性强：抗原与抗体的免疫反应是专一反应，而免疫酶技术以免疫反应为基础，所检测的对象是抗原（或抗体），使用的抗体除标记了酶以外，与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。

    灵敏度高：由于抗体联结上了酶，因此，借助于酶与底物的显色反应，显示抗原与抗体的结合，大大提高了检测的灵敏性，使检测水平接近放射免疫测定法。

    样品易保存：经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定，因此有利于样品的保存。

    植物赤霉素（GA）ELISA检测试剂盒液体类标本要求：

    包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

    1）血清：

    室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

    2）血浆：

    应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

    3）尿液：

    用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

    4）细胞培养上清：

    检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/ 分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并 放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

    5）组织标本：

    切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

    植物赤霉素（GA）ELISA试剂盒包含以下各组分：

    （1）结合物及标本的稀释液；

    （2）洗涤液，在板式ELISA中，常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水；

    （3）酶标记的抗原或抗体（结合物）；

    （4）酶的底物；

    （5）阴性对照品和阳性对照品（定性测定中），ELISA试剂盒参考标准品和控制血清（定量测定中）；

    （6）已包被抗原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）；

    植物赤霉素（GA）ELISA检测试剂盒操作流程：

    1，试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

    2，实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

    3，不用的其它试剂应包装好或盖好。

    4，使用一次性的吸头以免交叉污染，避免使用带金属部分的加样器。

    5，使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

    6，洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

    7，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。

    8，严格按照说明书的操作方法进行操作。说明书以英文说明书为主。

    植物赤霉素（GA）ELISA检测试剂盒预期应用注意事项：

    1.不同厂家生产的试剂盒因生产工艺和操作方法略有不同，务必按照所用试剂盒严格操作，否则容易产生检测结果的不确定性。

    2.若不同批号EILSA试剂盒的不同组分（A液或酶工作液），或不同试剂的不同组分进行交叉使用，有可能出现显色浅或本底高，花板等情形。

    3.反应时间的误差，做大量标本时，孔和*后一孔以及一些特殊标本可能影响较大。

    4.临界值附近标本波动为正常现象，任何试剂均不可避免。可以考虑将标本做奇数次复检。

    5.加样时样品量误差，对于阴或很阳的标本影响不大，但对阈值附近的标本影响极大，建议校对加样器。

    植物赤霉素（GA）ELISA检测试剂盒实验方法：

    1、加入待测标本每孔0.05ml，并设HBsAg阳性对照2孔，HBsAg阴性对照2孔，空白对照1孔，然后加入酶结合物每孔1滴（0.05ml、空白对照孔不加），充分混匀后置37℃孵育30分钟。

    2、洗板：弃去反应条孔内液体、拍干、用洗涤液注满每孔，弃去拍干，反复五次后拍干。

    3、显色剂：先加显色剂A每孔1滴（0.05ml），然后再加显色剂B每孔1滴（0.05ml），混匀，37℃孵育10分钟。

    4、每孔加终止液1滴（0.05ml），混匀。

    注意事项：

    1、试剂盒置2℃～8℃保存。

    2、使用前试剂应摇匀，并弃去1～2滴后垂直滴加。

    3、从冷藏环境中取出试剂盒内全部瓶装试剂及待测标本所需微孔条，置室温平衡30分钟后再行测试，余者应及时封存于冰箱中以备后用。

    植物赤霉素（GA）ELISA试剂盒标本采集及保存：

    1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨；

    2、 加进样品体积3倍的提取液（10% TCA）， 置于-20 过夜；

    3、 请于4 ，8000rpm，离心1小时，弃上清，收集沉淀；

    4、 沉淀加进等体积的冰浴丙酮，混匀后于4 离心（8000rpm，15分钟），弃上清并真空干燥，保存备用；

    5、 上样前加进裂解液（2.7g 尿素，0.2g CHAPS，溶于往离子水中至终体积5ml），混匀后室温放置30分钟，然后4 离心（8000rpm，15分钟），取上清并暂时保存于4 待用。

    注：以上标本均应密封保存，4 保存应小于1周，-20 不应超过1个月，-80 不应超过2个月

原创作者：上海远慕生物科技有限公司