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兔子胆固醇酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒操作步骤
阅读次数:646 发布时间:2018/3/23 11:27:11
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    中文名称:兔子胆固醇酯转移蛋白(CETP)elisa试剂盒

    英文名称:Rabbit cholest erolester transfer protein,CETP ELISA kit

    规格:96T/48T

    用途:用于测定人血清、血浆、组织及相关液体样本中的含量或活性。

    产品特点:是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法,由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检。

    试剂盒成分:酶标板,试剂,标准品ELISA试剂盒检测范围:人、绵羊、山羊、牛、马、小鼠、大鼠、猪、兔、其它动物细胞因子、植物细胞因子、细胞凋亡、活性多肽、自身抗体、血栓与止血、骨代谢、肝纤维化、肿瘤、激素内分泌、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
 


 

    检测原理:

    试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被样本抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的样本呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

    试剂盒性能:

    1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。

    2. 灵敏度:检测浓度小于(参考说明书)

    3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

    4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。

    5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。

    6. 有效期:6个月

    操作常见问题:

    1.边缘效应使用96孔板的ELISA测定中,常发现有“边缘效应",即外周孔显色较中心孔深。经研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体,在实验室的常规ELISA测定中,将板从室温(通常在25℃左右)置于37℃温箱,板也升温时,在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时,将板和溶液均加热至温育温度(如37℃),就可以很容易地排除“边缘效应",并且可提高测定的重复性。

    2.加样:在现在的ELISA商品试剂盒中,必然有使用微量加样器加入样本的步骤。注意的关键点是:加样不可太快,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡。加样太快,无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。所以,有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性,下次测定为阴性,往往就是上述加样及试剂的错误所致。

    兔子胆固醇酯转移蛋白(CETP)elisa试剂盒备注:

    1. 用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。

    2. 每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是*后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。

    3. 为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。

    4. 未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液、或辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。

    5. 建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。

原创作者:上海远慕生物科技有限公司

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