抗体,是我们非常熟悉的一种生物试剂, 但我们对抗体的鉴定,选择又了解多少呢某著名抗体公司的科学家在行业内提出全新的抗体选择标准“PASS”。通过客观的参数指标和专家的观点,科研人员只需要仔细的阅读抗体的说明书,再结合 “PASS”的抗体选择标准,就可以在一定程度上自己鉴定选择抗体的品质。
“PASS”抗体选择标准是指科研人员在选择抗体的时候,应留意抗体说明书中抗体纯化工艺(Purification),抗原信息(Antigen),抗体的特异性(Specificity)以及抗体的种属来源(Species)这四个方面的相关信息。
Purification
抗体的优劣,包括特异性,效价等方面和生产抗体过程中使用的纯化工艺是直接相关。但科研人员在选择抗体的时候去常常忽略这个方面。
在行业内,使用
蛋白A或G纯化单克隆抗体的方法被广泛接受。那么,多克隆抗体纯化工艺呢?
很多公司都使用亲和纯化(affinity purification)的方法来纯化多克隆抗体,该技术的关键在于使用的亲和原(affinity ligand)。 为了得到效价更高,特异性更好的抗体,一流的抗体公司尽可能使用全蛋白做为亲和原去得到优质的抗体,而且常常还会进行第二
步的蛋白A或G的分化。相反,使用多肽作为亲和原,纯化到的多抗表位有限,多抗的效价和特异性都会大打折扣。因此, 一流的抗体公司的多克隆抗体的效价,特异性的优势明显,而且很多多克隆抗体可以用于中和和阻断实验。
目前用于抗体生产的抗原主要有两种:一种是使用
仪器合成的不具备生物活性的多肽。使用多肽作为抗原的有三个缺点:
(1) 使用多肽来源的抗体所做的实验结果重复性较差;
(2) 因为很多公司并不提供作为抗原的多肽序列信息,因此对发表论文或者科研数据方面都有潜在的风险;
(3) 一般而言,较活性全蛋白来源的抗体,多肽来源的抗体的特异性和效价都比较低。一流的抗体公司坚持使用具有活性的全蛋白作为抗原,由此得到的抗体效价,特异性和可重复性方面更胜一筹。由此得到的抗体自然识别样本的能力和准确性也更高。
专家观点
科研人员认为对于那些不提供多肽信息的抗体,科学界是应该抵制的。
原创作者:上海远慕生物科技有限公司