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远慕生物:SDS-PAGE的主要应用有哪些?
阅读次数:1263 发布时间:2018/12/24 10:20:27
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SDS-Page 因易于操作,而具有广泛的用途,是许多研究领域的重要的分析技术。



1. 蛋白质纯度分析;

2. 蛋白质分析量的测定,根据迁移率大小测定蛋白质亚基的分子 量;

3. 蛋白质浓度的测定;

4. 蛋白质水解的分析;

5. 免疫 沉淀蛋白的鉴定;

6. 免疫印迹的步;

7. 蛋白质修饰的鉴定;

8. 分离和浓缩用于产生抗体的抗原;

9. 分离放射性标记的蛋白质;

10. 显示小分子多肽。

SDS-PAGE有效分离范围取决于聚丙烯酰胺的浓度和交联度,其孔径随着双丙烯酰胺与丙烯酰胺比率的增加而减小,比率接近于1:20时,孔径达到*小值。分子量低于10kD的小分子肽类,即使用较高浓度的聚丙烯酰胺凝胶的SDS-PAGE也不能完全分离,或是显不出色,或是显带较弱,带型弥散。且分子量越小,效果也越差。

为了能在SDS-PAGE上显示测定小分子量的多肽,通常采取两种方法:一是增加凝胶的浓度和交联度,在制胶时加入一些可以降低聚丙烯酰胺凝胶网限孔径的溶质分子,使用尿素、甘油或蔗糖等物质;二是选择缓冲液中的拖尾离子的种类和浓度以达到改善多肽的分离效果。

生物试剂的使用常识:
(1)试剂切忌与手接触(有些试剂有强腐蚀性、等特性)。
(2)要用洁净的药勺,量筒或滴管取用试剂,绝对不允许用同一种工具同时连续取用多种试剂。取完一种试剂后,应将工具洗净(药勺要擦干)后,才可取用另一种试剂。
(3)试剂取用后一定要将瓶塞盖紧,不可放错瓶盖和滴管,绝不允许张冠李戴,用完后请及时将瓶放回原处,以免遗忘,带来不便。
(4)已取出的试剂不能再放回原试剂瓶内(怕产生原试剂的再次污染)。

原创作者:上海远慕生物科技有限公司

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