在细胞实验室里,污染是
细胞培养的大害,预防和避免细胞污染是细胞培养成功的关键。细胞培养过程中细胞污染的来源有哪些?
细胞污染的来源
细胞培养过程中细胞污染的来源主要有以下几条途径:
1、不洁的动物组织标本
很多动物组织本该是无菌的(直接与外界相通的呼吸道和消化道、泌尿系统除外),但由于取材时不小心也会有污染的机会。组织本身含有细菌,如取材时不用浓的抗生素洗液洗涤浸泡,也会带菌,造成细胞污染。
2、空气
空气中含有大量的微生物,如果操作室与外界隔离不严或消毒不充分下,很容易造成细胞污染。另外,净化工作台使用过久,滤板未定期更换或长久不更换,滤气受尘埃堵塞,工作时不带口罩或外界气流过强,污染空气进入操作区,也会导致污染。春夏季南方地区多雨,空气湿度大,含菌量多,工作不注意也易造成污染。
3、清洗消毒
培养用物品、材料洗刷不净,培养用液和器材灭菌不彻底也会引入微生物和有毒物质。
4、操作不当
来自操作者的污染主要有以下几方面:
1)器材和
溶液使用前未仔细检查是否污染过,或者是否已经消毒灭菌处理过,或者虽经处理,时隔已久又末重新处理。
2)操作者未戴口罩、帽子,呼出气中排出细菌和支原体。
3)培养瓶口未用75%酒精擦和烧灼。
4)操作者不当心,动作不正确而将吸管或无菌器具碰到了污染的物品,如手上皮肤和瓶子外壁等。
5)细胞倾液时倒出培养瓶或者滴落在超净台上,未及时擦净或者灼烧。
6)灼烧的火不够旺。
7)移液管吸取液体时将空气中的气流吸入培养瓶中。
8)长时间的将离心管放在
离心机中,可能由于口没有完全封闭而造成污染。
9)同一根吸管或者放置吸管的离心管长时间使用会造成一管污染多瓶细胞交叉污染。
10)操作者来回走动扬起灰尘等。
5、血清
市面上出售的血清灭菌不彻底,潜在病毒和支原体污染
原创作者:上海远慕生物科技有限公司