植物DNA的提取和纯化是植物基因工程研究的基础操作。实施分子标记、基因图谱、基因指纹图谱、基因文库构建、遗传多态性分析、DNA重组、RAPD（随机引物多态性DNA）、RFLP（限制性酶多态性）、基因分离及遗传转化和鉴定等都以提取DNA为前提。

目前，对从植物组织中提取DNA方法的要求是：简便、有效、快捷以及经济。与动物组织相比，植物组织含有较多的多糖和其他次生代谢产物（酚、酯、萜、色素等），这给高质量的DNA提取带来较多的困难。尤其是多糖成分是影响DNA纯度*常见的问题。如何做到既去除这些污染物又能相对保持高的产量，并且能简捷有效地提纯，一直是植物生物技术研究者探索的问题。

对于普通的植物（低酚、低酯、低糖等）如：水稻、白菜、苋菜、南瓜、黄瓜、西红柿、上海青、菠菜、笋瓜、冬瓜、莲藕、山药、竹笋等；我们可以选用普通植物DNA提取试剂盒（磁珠法）试剂

对于多糖、多酚类植物（香蕉、西瓜、苹果、梨等果肉，红薯、马铃薯等块茎，棉花、月季、枇杷、益母草、夏枯草等人参、曼陀罗、向天果、射干、桔梗、满山红、金鸡纳霜等药用植物）可以选用多酚植物DNA提取试剂盒（磁珠法）试剂，针对类似的植物我们经过长期的优化，可以得到较好的实验结果。

以叶片为例，叶片需先剪碎成小块，以便放入1.5ml离心管。*佳样本的长度应在1cm 以下。重量不超过250mg，推荐使用50mg，如果是植物种子粉末可以使用10mg-20mg粉末即可。

一、匀浆介质

一般采用 0.05 mol/L Tris-HCl，pH 7.4 磷酸盐缓冲液（PBS），客户可根据样本及测定方针的状况自行设定浓度，目的是坚持样本的等渗环境。

二、组织匀浆的制备

1、取组织块（0.2g～0.5g）可到 5～10mg 在严寒的 PBS 中漂洗，滤纸拭干，称重，放入 5ml 的匀浆管中。

2、按重量 (g)：体积 (ml)=1:4 的比例参与 4 倍体积的匀浆介质于匀浆管中，冰水浴条件下，用眼科小剪赶快剪碎组织块。  

3、匀浆的方法：手工匀浆，机器匀浆。

① 手工匀浆：左手持匀浆管将下端刺进盛有冰水混合物的器皿中，右手将捣杆笔直刺进套管中，上下转动研磨数十次（6～8 分钟），充沛研碎，制成 20% 的匀浆液。

② 机器匀浆：用组织捣碎机 10000～15000 转 / 分 上下研磨制成 20% 组织匀浆，也可用内切式组织匀浆机制备（匀浆时间 10 秒 / 次，空隙 30 秒，接连 3～5 次，在冰水中进行，可适当延伸匀浆时间），

4、将制备好的 20% 匀浆液用一般离心机或低温低速离心机 4000 转 / 分左右，离心 10～15 分钟，取上清液进行测定.

三、样本保存

植物组织样本暂时不测定，可立即低温冻存，温度越低越好，中心如不重复冻融，-20 ℃ 以下可保存三个月，-70 ℃ 以下可保存六个月。 制备好的匀浆液主张不要冻存，当天进行测定，如放置时间过长相关酶活会有所下降，部分方针 4 ℃ 可存放 3～5 天（如 SOD 要存放 2～3 天，MDA 可存放 3～5天，总蛋白测定可存 5～7 天）。

原创作者：上海远慕生物科技有限公司