人源细胞系(通过选择的永生细胞株,包括HeLa、OVCAR-3和LNCaP等常见癌症细胞系),人源细胞系是一个统称,实验室常用的有结肠癌肿瘤细胞系,该细胞系中可检测到活跃的人源。
人神经胶质细胞系,衍化神经营养因子(GDNF)ELISA试剂盒,常用检测步骤:
(1)将待检血清用稀释液从1:100开始作2倍连续稀释,加入抗原孔,100μl/孔,同时设阴、阳性对照,37℃水浴1小时;
(2)弃去血清,用洗涤液洗涤5~6次;
(3)加酶结合物,用稀释液按工作浓度稀释,100μl/孔,37℃水浴1小时;
(4)弃去酶标
抗体,用洗涤液洗涤6次,甩干;
(5)加显色液:于各反应孔内加A/B液各一滴,37℃,避光3~5分钟;
(6)加终止液于每反应孔,一滴/孔。
人源细胞系细胞来源主要有:
同一个实验室可以传承师兄师姐的细胞系。
搜集标本,学习师兄师姐的成熟方法培养原代细胞。
或者通过各方面打听,向别的实验室“化缘”而来。
另立门户,满寻找新的细胞。
细胞来源控制:
一般从各个来源获得的细胞,换一个环境培养的时候都需要经过一个磨合期。
原代细胞培养尽量不要传太多代,不要轻易更换培养条件。
通常细胞系传代培养几代以后状态会变好。如果状态一直很差,可以通过观察细胞形态等确定细胞是否老化、污染、凋亡等。
一般人源细胞系细胞培养注意事项:
1.传代培养时要注意无菌操作并防止细胞之间的交叉污染,所有操作要尽量靠近酒精灯火焰。每次只进行一种细胞的操作。每一种细胞使用一套器材,培养用液应严格分开。
2.每天观察细胞形态,掌握好细胞是否健康的标准:健康细胞的形态饱满,折光性好,生长致密时即可传代。
3.如发现细胞有污染迹象,应立即采取措施,一般应弃置污染的细胞,如果必须挽救,可加含有抗生素的BSS或培养基反复清洗,随后培养基中加入较大量的抗菌素,并经常更换培养基等。
原创作者:上海远慕生物科技有限公司