原理
HiCrome ECC显色
培养基使用了HiVeg特别
蛋白胨替代动物源特别蛋白胨,使得培养基无BSE/TSE风险。该培养基为鉴别培养基,用于初步鉴定来自食品和环境样品的大肠杆菌和其他大肠菌群(3)。
培养基含两种显色原。一种被大肠埃希菌的葡萄糖醛酸酶裂解,产生蓝色至紫色菌落,另一种被大肠菌群的半乳糖苷酶裂解,产生玫瑰红-粉色菌落(1,2)。HiVeg特别蛋白胨和酵母粉提供氮源物质、维生素B和其他必要生长营养素。乳糖提供可发酵的碳水化合物,中性红为pH指示剂。磷酸氢二钠和磷酸二氢钾为培养基的缓冲液。氯化钠有助于维持渗透压平衡。
使用前使培养基表面干燥。用0.1%的HiVeg蛋白胨水(货号MV028)进行1:5或1:10稀释食品样品并进行样品匀浆。将匀浆液0.5ml或1ml用无菌玻璃涂布棒涂布在琼脂表面并在35-37°C孵育18-24小时。孵育结束后对蓝/紫菌落进行计数,并乘以稀释因子。大肠埃希菌的数目以每g食品为单位报告。
培养基组成
成分
克/升
HiVeg特殊蛋白胨
5.00
酵母粉
3.30
乳糖
2.50
磷酸氢二钠
3.50
磷酸二氢钾
1.50
氯化钠
5.00
显色混合剂
20.30
中性红
0.03
琼脂
15.00
*终 pH (25°C) 6.8±0.2
配制
55.83克溶于1000 ml蒸馏水。轻轻加热使培养基完全溶解。15磅(121℃)高压灭菌15分钟。冷却至50℃。混匀并倾注无菌平皿。培养基可能不透明,不过不影响其性能。
质量控制
粉末外观:淡粉色均一自由流动粉末。
成胶性:结实,相当于1.5%琼脂糖凝胶。
制备好的培养基的颜色和透明度:平皿内为粉红色不透明凝胶。
配比后的pH值:5.58%水
溶液(5.58g干粉/100ml水溶液)配好后,pH值自动为6.8 ± 0.2(25°C)。
培养反应
35-37°C培养18-24小时后,观察培养反应
有机体
生长
菌落颜色
大肠杆菌(ATCC 25922)
旺盛
蓝/紫
肺炎克雷伯菌(ATCC 13883)
旺盛
玫瑰红/粉红
铜绿假单胞菌(ATCC 27853)
好-旺盛
稻草色
原创作者:上海远慕生物科技有限公司