大多数原代贴壁细胞贴壁时间是6h到12h，细胞不贴壁有好多种原因的：
1、如果你用玻璃培养瓶培养的话，有可能你的瓶子没处理好；建议你用一次性培养瓶，进口的都可以。
2、一般做原代细胞贴壁培养用胰酶消化，消化的程度要掌握好，如果消化时间不到、分散不均匀不贴壁。一般消化有热消化，就是放在37度里消化，时间比较短不好控制，传代培养常用。还有就是冷消化放在4度里，一般在几个小时以上，胰酶浓度也有要求的，一般都用0.125－0.25％之间。ph在7.6左右。
3、还有就是天然培养基的选择，就是血清种类，血清能够使细胞贴壁，并且提供细胞生长的重要营养成分。

细胞培养中的不贴壁及分化的解决办法

如果细胞呈现不贴壁现象，且细胞根本就不能锚定的解决办法:
1、可以在铺有琼脂和琼脂糖的培养皿上克隆细胞，也可在衬有琼脂的甲基纤维素的非组织培养用平皿制备细胞克隆。
2、在这些支持物中应适当添加生长因子及添加物。3、如使用组织培养用平皿克隆细胞，应在灌制琼脂等支持物铺加饲养层。

如果细胞呈现不贴壁现象，但细胞能够锚定但贴壁不佳的解决办法:
使用铺加了甲基纤维素的组织培养用用培养皿进行细胞克隆。

细胞培养如果细胞不发生分化，解决办法如下： 
1、更换能够诱导细胞分化的培养条件。 
2、在细胞分离和传代中使用选择性培养基。

细胞培养中如果所养细胞丧失产物形成能力，解决办法如下： 
1、采用PCR及Northern杂交方法，检测相关基因表达能力。 
2、采用PCR及Northern杂交方法检测报告基因和方案。 
3、使用分化诱导条件。 
4、在细胞分离和传代过程中针对特定细胞使用相应的选择培养基。

原创作者：上海远慕生物科技有限公司