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PCR实验室污染核酸假阳性问题如何处理?
阅读次数:675 发布时间:2021/3/30 10:21:44
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为避免结果假阴性、假阳性以及出现误差,需要实验室人员及时发现实验室存在的不足并加以改正,这样才能为临床的进步治疗提供精准的数据。

产生污染主要有以下4个原因:

①是PCR扩增产物的污染。这也是常见的污染原因。PCR产物经反复多次的扩增,其复制量远远超过PCR的检测限,所以即使是微量的污染也足以造成实验结果假阳性。

②试剂的污染。在试剂的配制过程中,接触了污染的容器、移液器、枪头、溶液等物导致试剂被污染。

③待测样品被污染。放置样品的容器被污染或由于容器密封不严导致样品与外界接触被污染;其次在核酸提取过程中使用了被污染的移液器或枪头导致样品被污染;另外,某些样品中含有病毒,若弥散到空气中则有可能形成交叉污染。

④气溶胶污染。若气溶胶中包含病毒等污染物扩散至空气中有可能造成PCR产物污染。气溶胶是由空气与液体表面摩擦而产生的,开盖、晃动反应管及污染加样器的反复吸样都可形成气溶胶从而导致交叉污染。据计算个气溶胶颗粒可含48 000 拷贝,因此,应尤其重视由气溶胶导致污染的问题。PCR 实验室只要出现了污染,之的结果报告就变为无效而且也无法进行其他的实验操作。必须找出并彻底清除污染源,才能得到准确有效的实验结果。

为了提高实验室的检测质量,避免实验室污染以及确保实验室的生物安全,规范有效的管理是实现这切的根本措施。但有时会出现管理不到位甚至是疏忽的地方,比如随意出入实验室,甚至逆行;没有按照规范穿戴口罩、鞋套;试验期间缓冲间两侧门同时打开;实验完毕后忘记开紫外灯消毒等。这些不规范的行为为实验室的安全和污染埋下了隐患,从而影响检验结果的准确性。因此,有效的管理和实验室操作规程的规范执行尤为重要。

原创作者:上海远慕生物科技有限公司

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