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peg诱导细胞融合失败因素
阅读次数:45 发布时间:2024/6/11 14:25:09
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细胞融合技术是细胞工程中的一项核心基础技术。细胞融合技术在基因定位、基因表达产物、肿瘤诊断核治疗、生物新品种培育及单克隆抗体技术等域有着非常广泛的应用景。单克隆抗体技术就是通过细胞融合技术发展起来的,在生命科学研究和应用方面产生了重大影响。生物技术发展也很快,细胞融合技术也在发展,到底哪一种技术是常用,教材也没有统一说法,所以也很难说哪种常用。

利用聚乙二醇(PEG)诱导细胞融合,可以促使两个不同基因型的细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。

影响因素具体如下:

1.PEG的分子量与浓度

细胞融合效果与PEG的分子量及其浓度成正比;但PEG的分子量越大、浓度越高,对细胞的毒性也就越大。为了兼顾二者,在实验时常常采用的PEG分子量一般为1000-4000,浓度一般为40-60%。

2.PEG的PH值

经验证,PEG的PH值在8.0-8.2之间融合效果/好。

3.PEG的处理时间

处理时间越长,融合效果越好,但对细胞的毒害也就越大。故一般将处理时间限制在1分钟之内。本实验中细胞融合后无需继续培养,故处理时间可适当放宽至数分钟。

4.融合时的温度

由于生物膜的流动性与温度成正比,故细胞的融合效果也与温度成正比。因此,为了获得更好的融合效果,在细胞可能承受的温度范围内可适当提高处理的温度。对于哺乳动物的细胞,一般采用的温度为38-40℃。

原创作者:上海远慕生物科技有限公司

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