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紫外可见分光光度计是利用物质的分子或离子对某一波长范围的光吸收作用,对物质进行定性分析,定量分析及结构分析,所依据的光谱是分子或离子吸收入射光中特定波长的光而产生的吸收光谱。按照所吸收光的波长区域不同,分为紫外分光光度法和可见光光度法,合称为紫外-可见分光光度法。
特点
1 与其它光谱分析方法相比,其仪器设备和操作都比较简单,费用少,分析速度快;
2 灵敏度高;
3 选择性好;
4 精密度和准确度较高;
5 用途广泛。
组成结构
1 光源
(1)光源:提供符合要求的入射光。
(2)要求:在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱, 具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。
2 单色器
(1)单色器:将光源发射的复合光分解成连续光谱并可从中选出任一波长单色光的光学系统。
(2)单色器主要由狭缝、色散元件和透镜系统组成。
Ø色散元件是棱镜和反射光栅的组合。
Ø狭缝和透镜系统控制光的方向。
(3)棱镜单色器
Ø利用不同波长的光在棱镜内折射率不同将复合光色散为单色光。
(4)光栅单色器
Ø一系列等宽、等距离的平行狭缝Ø以光的衍射现象和干涉现象为基础(平面反射光栅和平面凹面光栅)
3 吸收池
(1)吸收池:又叫比色皿,用于盛放待测溶液和决定透光液层厚度的器件。
(2)主要有石英吸收池和玻璃吸收池两种。
(3)在紫外区须采用石英吸收池,可见区一般用吸收玻璃池。
(4)主要规格0.5cm、1.0cm、2.0cm、3.0cm和5.0cm。
注意事项:手执两侧的毛面,盛放液体高度四分之三。
4 检测器
(1)检测器:利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号。
(2)常用的检测器有光电池、光电管及光电倍增管。
5 信号显示系统
(1)以检流计或微安表指示仪表。
(2)数字显示和自动记录型装置。
操作步骤
(1)打开电源开关。
(2)检验吸收池的成套性(具体过程在后面内容中操作)。
(3)选择工作波长(按设定键,以及增加、减小按钮,进行设定)。
(4)选择测量方式(按方式键选择透射比模式与吸光度模式)。
(5)润洗比色皿,依次装入参比溶液和测量溶液。
(6)参比溶液于光路中,透射比模式下同时调0和100%。
(7)在吸光度模式下,测定测量溶液的吸光度。
原创作者:上海远慕生物科技有限公司
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