原理：麦胚凝集素(WGA)是从谷物中提取出来，可以特异性的结合心肌细胞膜上的一种糖蛋白，二者结合起来可以将心肌细胞膜染出来。WGA 可以把心肌细胞膜染出来，这样是否肥大的细胞从图像与正常组的对比就可以看出，也可以用专门的软件对染出的细胞进行直径、面积等的测量，能够分析心肌细胞是否肥大。

试剂盒组成：

iFluor 488-WGA 染色液（即用型） 抗荧光淬灭封片剂（干固型）   DAPI（即用型）

使用方法：

1、样本准备：

1）石蜡切片：依次将切片放入二甲苯Ⅰ15min-二甲苯Ⅱ15min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ。取出放在通风厨内，酒精晾干后放入自来水中稍洗，蒸馏水洗。

2）冰冻切片：取出低温冷冻的冰冻切片复温后，切片浸没于固定液中固定 10-30min，PBS 洗5min 重复 3 次。

3）细胞爬片（固定）：培养好的去掉培养液，PBS 清洗 3 次，在细胞爬片上滴加固定液固定 10- 30min，PBS 洗 5min 重复 3 次。

2、抗原修复：组织切片置于盛满 PH 9.0 EDTA 碱性抗原修复液或者 PH6.0 柠檬酸修复缓冲液的修复盒中于微波炉内进行抗原修复。自然冷却后将玻片置于 PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤 3 次，每次 5min。(新鲜组织冰冻切片和细胞爬片省略此步骤）。

3、WGA 染色：组化防水笔画圈，然后滴加 iFluor 488-WGA 染色液于 37 度染色避光孵育 30min-2h（湿盒内放少量水），PBS 洗 5min 重复 3 次。

4、DAPI 复染细胞核：滴加 DAPI 即用型染液，避光室温孵育 5min-20min，PBS 洗 5min 重复 3 次。

5、封片：玻片滴加适量抗荧光淬灭封片剂，轻轻的从一侧盖下盖玻片（建议使用本试剂盒内抗荧光淬灭封片剂 ，封片过程应避免气泡）。

6、镜检拍照：切片于荧光显微镜/共聚焦/多通道荧光扫描仪/多光谱成像系统下观察并采集图像。

结果：Dapi 复染细胞核呈蓝色；iFluor 488-WGA 标记阳性呈绿色

注意事项：

1、WGA 染料存在淬灭的可能，建议试用本试剂盒内的抗荧光淬灭封片剂，并尽快成像。

2、对于活细胞染色，可不用固定，用 PBS 清洗掉培养液后，加入 WGA 染料 37 度避光 10-30min。

3、固定后的样本（如石蜡切片），须经过高温修复否则会造成染色阳性结果偏弱。

4、对于细胞样本，染色前避免使用通透液，否则会造成细胞内（如高尔基体和内质网）结构的染色。

5、WGA 染料建议分装后-20 度保存，尽量避免反复冻融。

原创作者：上海远慕生物科技有限公司