上海远慕教您如何选择ELISA试剂盒的OD值_新闻中心

公司新闻

上海远慕教您如何选择ELISA试剂盒的OD值
阅读次数：629 发布时间：2016/11/11 16:36:03

分享到：

elisa试剂盒一般底物效果时刻，以10-30分钟为宜。底物运用液有必要新鲜制造，尤其是H2O2在临用前参加。

ELISA试剂盒进行各项试验条件的挑选是很首要的，其间包含:

固相载体的挑选：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。

其方法可所以凹孔平板、试管、珠粒等。现在常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。

不管何种载体，在运用前均可进行挑选：用等量抗原包被，在同一试验条件下进行反响，查询其显色反响是不是均一性，据此判明其吸附功用是不是超卓。

包被抗体（或抗原）的挑选：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时，央求纯度要好,吸附时一般央求PH在9.0～9.6之间。

吸附温度，时刻及其蛋白量也有必定影响,一般多选用4℃ 18～24小时。

蛋白质包被的*适浓度需进行滴定：即用不一样的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg/ml等）进行包被后，在其它试验条件相一同，查询阳性标本的OD值。

ELISA试剂盒挑选OD值而蛋白量起码的浓度。

对于大都蛋白质来说一般为1～10μg/ml。

酶符号抗体作业浓度的挑选：首先用直接ELISA法进行开端效价的滴定（见酶符号抗体部份）。

然后再固定其它条件或选用“方阵法”（包被物、待检样品的参看品及酶符号抗体分别为不一样的稀释度）在正式试验体系里精确地滴定其作业浓度。

酶的底物及供氢体的挑选：对供氢体的挑选央求是价廉、安全、有明显地显色反响，而自身无色。

有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌效果，应留心防护。

ELISA试剂盒有条件者应运用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是现在较为满意的供氢体。

底物效果一段时刻后，应参加强酸或强碱以连续反响。