1.准备好所有试验额定所需物品，如试管、吸头、移液器、离心机等；
 

2.依据检测标本数量确认所需试剂的量；

 

3.按阐明书将所用试剂平衡至室温，制造所需试剂；

 

4.标本制备要规范，每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备，尽量分装做备份。短期内无法试验者，留意低温保存。

试验中为了确认信号和背景应将捕获抗体（0.5-4μg/ml）和检测抗体（0.25-2μg/ml）在预试验中进行彼此相抗的滴定。同时，应包括在适当范围内的规范品的系列稀释。按试剂阐明书惯例供给的范围进行操作。

规范品的制造：对于每种细胞因子应仔细阅读阐明书，留意每批的细节。在运用细胞因子前，瞬时离心试剂瓶，尽可能多地回收其间的细胞因子。依据每批阐明书中的细节，将冻干的细胞因子复溶。

为了优化灵敏度，主张过夜孵育规范品和标本。若运用过氧化物酶作为显色体系，应禁止在洗液和稀释液中加叠氮钠，叠氮钠可抑制过氧化物酶的活性。当测定混合液体中的抗原时，如血清，主张在标本稀释液中加不相干的Ig。

常见问题以及解决方法：
1、试剂的选择：选择优良试剂大家都是知道的，但是在检测之前还应该提前半个小时将试剂拿到常温下进行解冻；
2、加样中可能遇到的问题：在做血清或是血浆用于检测试剂的时候，会碰到血清血浆不好分离的情况，这个时候的解决办法是先放在常温中1到2小时，然后在进行离心处理；
3、洗板时容易造成误差： 因为洗板是人工洗的，所以判断什么时候洗干净了也是人为判断的，这个时候带有主观色彩，所以多清洗几次，还有就是在洗的时候孔与孔之间的液体容易交叉流动；
4、显色问题： 使用了过期的显色剂或者是显色剂用过后放置时间太长，都有可能造成显色剂不显色。所以在进行显色反应的时候，要先查看显色剂本身的情况；
5、终止反应：在加终止剂的时候由于倾倒速度快，差生气泡，造成假阳性结果。所以在倒终止剂的时候要缓慢倒；
6、读板：读板的时候首先应该保证板的清洁干净；
7、严格按照说明书操作。