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PCR方法操作中的注意事项
阅读次数:521 发布时间:2020/9/7 10:30:15
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  聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction),简称PCR,是一种分子生物学技术,用于放大特定的DNA片段。可看作生物体外的特殊DNA复制。

PCR是实验室常用的实验方法,那么在PCR方法操作中,需要注意哪些事项呢?今天小编带您了解一下。

配 胶

1.电子称的使用,要时刻注意保持电子称的精确性,保持清洁,根据不同的浓度的胶称琼脂糖。

2.加 TAE(化学试剂)的量要适当,以免配出来的胶太薄导致胶孔太浅或浓度太低。

3.倒胶前胶托一定要洗干净,并擦干;倒胶时要待胶冷到一定温度摇匀尽量不要产生气泡。若胶液的温度太高要顶在胶托防止胶托变形。

点样电泳

1.loading要点均匀,控制在 1~2ul的量,并做好对应标记。

2.加样时,枪头要上紧,吸样均一准确,排液时吸头不要有残留。

3.点样前检查待用胶是否合格;点样时要对准胶孔,尽量点完所有的样。

4.点完样勿忘点 marker并摆正胶位,电泳仪正负极不要插反,电泳槽的盖子要盖紧。

染 色

1.碰到 EB(化学试剂)的手套要及时丢弃。

2.EB液要适时跟换,盘子要清洗。

3.抹布要严格区分,不可交叉使用

凝胶图像分析仪的使用

1.使用前要注意清洁,以免影响胶图的清晰度。

2.照胶时尽量减少开紫外灯的时间。

3.拍照时先关摄像头再关紫外灯,不可颠倒,严格按照照胶的流程进行。

4.照好的胶及时丢弃。
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