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怎样给细胞做支原体筛查?
阅读次数:594 发布时间:2020/10/30 10:37:57
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细胞培养是实验室的常规操作和科研基础。其中,保证细胞不受支原体的污染是决定实验成败的重要环节。然而,支原体污染细胞的发生率又非常高,有报道高达63%。

那么,这些支原体污染是从哪里来的呢?常可见以下来源:


特别是支原体的污染能通过细胞操作产生的气溶胶或液滴传播。一瓶被支原体污染的细胞足以威胁到其他培养的细胞。因此,定期对细胞培养基、细胞培养上清进行支原体的监测是非常重要的。

在支原体的各种检测方法中,常规PCR法以其①灵敏度高,特异性好;②时间短,2-3小时出结果;③操作简单;④无须昂贵仪器等特点广受青睐。

但不同厂家生产的试剂盒质量差异较大(由于引物及内在设计不同),需谨慎选择,尽量在专业人员推荐指导下使用。

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精确度高——板间(inter)及板内(intra)差异性(cv)小;

重复性好——批次间的一致性高;

批内精密度(测定法精密内):cv%<8%

间精密度(精密检测间):cv%<10%

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