确保培养基平皿的质量需注意的事项
阅读次数:634 发布时间:2021/2/23 10:04:08
当科学技术飞速发展,有关微生物检测的高科技方法可谓如若瀚海。虽然培养皿检测微生物是个古老的、传统的检测方法,但由于它具有可以直接分离鉴别样品、操作方便、结果可靠等优点,所以至仍广泛应用于医药卫生,临床检验、实验动物、食品、化妆品、工农业、环保等众多域。在药品质量控制、安全评价和疾病诊断中尤其发挥着重要的作用。
培养基是微生物试验的基础,直接影响微生物试验结果,而成品预装培养基平皿是培养基中的种,是由脱水培养基完全溶解于水中,矫正PH值,然后灭菌和分装于平皿而成。无论是实验室配制的培养基平皿或商品化的成品预装培养基平皿,其质量都依赖于其制备的整个过程。采用不适宜方法制备的培养基将影响微生物的生长或复苏,从而影响试验结果的可靠性。所以要确保培养基平皿的质量,需特别注意以下事项:
1、选择适宜的培养基制备方法,不得使用结块或颜色发生改变的脱水培养基。
2、培养基灭菌应按照生产商提供的或经验证的参数进行,避免采用不适当的加热和灭菌条件,而引起培养基颜色变化、透明度降低、琼脂凝固力或pH值的改变。
3、应确定每批培养基灭菌后的pH值(冷却至室温25℃测定)。若培养基处方中未列出pH值的范围,除非经验证表明培养基的pH值允许的变化范围很宽,否则,pH值的范围不能超过规定值±0.2。
4、成品预装培养基平皿应确保无菌,并且平皿不得破裂,尽量避免形成气泡,固体培养基表面不得产生裂缝或涟漪,在冷藏温度下不得形成结晶,不得污染微生物等。
5、培养基升温灭菌过程中温度上升缓慢或灭菌后降温过慢,可能导致培养基的过热或过度灭菌,定程度上会降低微生物培养基促生长的质量,所以成品预装培养基平皿应通过微生物促生长试验进行验证。
6、用于环境监控的培养基平皿必须特别防护,好采用三层包装和终端灭菌。不建议采用实验室自制的培养皿通过100%预培养后用于洁净区环境采样,因为预培养过程中失水会影响微生物生长,且还存在培养皿被污染的可能。
7、贮藏和运输条件应使成品培养基低限度的失去水分并提供机械保护、避光保存。含琼脂培养基平皿不得在0℃或0℃以下存放,冷冻可能破坏凝胶特性。
培养基平皿制备过程质量控制和贮藏条件是提供优质培养基的保证。洁净区环境浮游菌、沉降菌及表面微生物监测用培养基般采用胰酪大豆胨琼脂培养基(TSA),必要时可加入适宜的中和剂;当监测结果有疑似真菌或考虑季节因素影响时,可增加沙氏葡萄糖琼脂培养基(SDA)。