实验方法原理 培养基是人工合成的种混合营养料，用于分离培养细菌。常用的有基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基等。

试剂、试剂盒

牛肉/膏 蛋白胨 氯化钠 蒸馏水 琼脂 NaOH 酚红指示剂

仪器、耗材

pH 试纸 三角烧瓶 量筒 天平 吸管

实验步骤

1.  称取牛肉/膏3 g，蛋白胨10 g，氯化钠5 g 加入1 000 ml 蒸馏水中，加热溶化。

2.  待冷至40－50℃时，测定并矫正酸碱度为pH7.6。通常未矫正的肉膏汤均呈酸性，故常用1/10 M NaOH 溶液进行矫正。

3.  酸碱度调整后，煮沸3－5 分钟，补足因蒸发失去的水量，待冷却后用滤纸使之过滤澄清。并重新测定酸碱度次，若变动较大，应再进行矫正。

4.  按应用时的需要量分装于适当的试管或烧瓶内，塞上硅胶塞并用牛皮纸包扎，置高压蒸汽灭菌器内，经103.4 kpa、121.3℃、20 分钟灭菌。

5.  灭菌后取出培养基，待冷至40℃以下时，放入37℃温箱24 小时做无菌试验，如无菌生长，即可备用。
 

众所周知，培养基是微生物生长、繁殖和代谢的混合营养物质培养基。由于微生物的营养类型不同，对营养物质的要求不同，实验研究目的不同，所以培养基种类繁多，原料也不同。为了达到实验和研究的目的，应该按照培养基的配方进行配制。

任何种培养基旦制成，都要及时彻底灭菌，以便进行纯培养。培养基培养基灭菌般采用高压蒸汽。那为什么培养基准备好后定要马上灭菌呢？

在发酵过程中，培养基灭菌主要有几个原因如果不灭菌，会因杂菌的消耗而损失生物反应的底物或产物培养基，导致生产能力下降

杂菌还会产生代谢产物，使产品提取更加困难，导致产量较低，产品质量较低

大量杂菌繁殖后，反应液的pH值会发生变化，反应会出现异常

些杂菌会分解产品，使生产失败培养基

如果出现噬菌体污染，产生细菌的细胞将被裂解，生产将失败。

培养基的灭菌是为了杀死培养基中的原生菌或附着在空气中的混合菌培养基，使目标菌更好的生长(减少混合菌对培养基中营养物质的消耗，有些混合菌会抑制你的目标菌的生长)。般来说，培养基人工培养的细菌基本上允许快速生长或尽可能产生代谢产物，因此允许它们在佳培养基上生长，以减少培养时间，提高经济效益。检查培养基灭菌效果的方法将培养基放入培养箱中进行培养(时间与培养实验致，般为24小时)，看灭菌后的培养基菌落即可判断。

有时候为了更科学的使用培养物，培养基方面培养基会在空气中被氧化，造成营养物质的流失

另方面，放置会导致细菌繁殖，培养基消耗养分培养基。