牛血清是细胞培养中用量大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有为重要的功能。
一、血清的成分
血清是由血浆去除纤维
蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。
二、血清的功能
1.提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。
2. 提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。
3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。
4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
5.起酸碱度缓冲液作用。
6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。
三、不同血清之间的差异
市场上各种血清产品角龙混珠,一不小心,你可能就使用了品质不好的血清。血清按照采血时间可分为胎牛血清,新生牛血清和小牛血清,三者的优劣顺序为:胎牛,血清>新生牛血清>小牛血清。
一般细胞建议使用胎牛血清培养,部分细胞可使用新生牛血清培养,小牛血清则不建议用于细胞培养。
四、血清选购的注意事项
1.产品关键指标
(1)低内毒素
内毒素是所有细胞培养的大敌,对细胞培养的影响性早在将近三十年就被广泛讨论和重视.。内毒素会改变细胞外形,影响下游生物途径反应,抑制酵素活性等,低内毒素对细胞培养作用重大。
(2)血红蛋白
根据血红蛋白含量的不同表现出黄色、淡黄色、橘红色、微红色等。细胞培养用血清的标准是血红蛋白含量不高于20mgldL,颜色越红,数值越高;反之,数值越低。品质好的一般呈琥珀色,偏红一般生产工艺较差
(3)微生物指标
包括细菌、霉菌、支原体、噬菌体、各类病原性病毒等
2.细胞增殖能力
每个产品针对的细胞不一样,产品出厂都会经过细胞实验验证,Corning的几款血清都是经过四种细胞检测,并且通过多种病毒检测。Bovogen是澳洲本土血清品牌,位于澳大利亚墨尔本,要知道澳大利亚和新西兰是上血源等很好的地方,尤其是新西兰,是上洁净的牛血清源地。
3.产品批次
因为血清来源于动物,其组成成分有1000种左右,每个批号的组分和组分含量都是不固定的,因此批间差异是可能存在的。