核酸染料目已经有很多种类型，我们在做实验进行选择的时候，有哪些因素制约着我们呢，我们应该用哪些指标去评价它们，终找到适合的染料呢？下面从安全性、灵敏度、稳定性、对染色效果的影响（比如染色方法、迁移率等）以及价格等方面来对染料进行评价。01、安全性

如果选择EB替代染料，那么染料的安全性就是一个非常重要的指标。安全性评估主要的检测有Ames测试、细胞渗透性实验、染色体畸变和正向突变分析、口服毒性分析等。在安全性方面，具有较多检测项目和相对权威的机构出具检测报告的核酸染料，安全性可能会更高；另外在一些报道或对比数据中，我们也可根据它们可能的原料来判断它们的安全性。

02、灵敏度

几乎所有的EB替代染料都宣称其染料的灵敏度至少不低于EB，甚至高于EB，具体到试验内容上，只要不是有特殊的需求（需要高的灵敏度），一般都能满足。

03、稳定性

核酸染料的稳定性和在各种条件下的染色效果，会直接影响观察到的染色结果。比如，Invitrogen的家发现pH会明显影响SYBR系染色效率，如果它高于8.3或低于7.5，它的检测灵敏度显著下降。这种情况很容易被忽视，就如常见的Tris缓冲液的pH值会随着温度的变化而变化。

04、迁移率

在介绍迁移率之，先了解下常用的核酸染料电泳中应用的3种方式。

（1）点染法：是指将核酸染料、样品和上样缓冲液混在一起，直接在胶上点样；

（2）胶染法：是指在将融胶倒入胶板，把核酸染料加入融化的琼脂糖凝胶溶液中混匀，然后再倒入胶板，这种方法也是常用的方法；

（3）泡染法：是指在电泳时不加入任何染料，在电泳完成后，将胶置入含有一定浓度核酸染料的染液中进行染色。

由于所有的核酸染料终都会结合到DNA上，才能通过染料从而对DNA进行分析，这也就意味着如果采用点染法或胶染法进行核酸检测时，根据使用的染料不同，核酸染料或多或少会对核酸的迁移率甚至带型产生影响。一般来说，核酸染料分子越大，安全性会越高；但同时，用胶染法对电泳的迁移率或带型影响就越明显，虽然可以通过减少核酸上样量等方式来进行改善，但仍达不到泡染法的效果。这也是为什么大多数核酸染料（低毒/无毒）厂商建议，采用泡染法来得到准确、漂亮的核酸带型。

当然，对带型、迁移率等的影响除了核酸染料外，还有其它的影响因素，比如琼脂糖的质量，电泳缓冲液的缓冲能力等都有可能对带型和迁移率产生影响。