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怎样才能做好血涂片的制作及染色?
阅读次数:423 发布时间:2023/5/26 10:29:35
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要做好一张血涂片,我们应该把它的原理,各种要求和影响因素熟记于心,还要加上适当的练习。

血涂片的制作

一、原理:将一小滴血液均匀涂在玻片上,呈单层分布,制成薄血片。用瑞氏染液进行染色。

二、载波片的要求:制备血涂片使用的载玻片要有很好的清洁度。新的载玻片常有游离碱质,应用清洗液或10% 盐酸浸泡24小时,然后再彻底清洗。用过的载玻片可放入适量肥皂水或洗涤剂的水中煮沸20分钟,再用热水将肥皂和血膜洗去,用自来水反复冲洗,然后擦干备用。

三、操作:

1、用毛细吸管吸取EDTA抗凝的外周血5-7UL,或者直接采集患者末梢血,将血滴滴至载玻片的一端约1CM处或整片的3/4端。有磨砂片的玻片,可在接近磨砂头的部位来水反复冲洗,然后擦干备用。

2、左手持载玻片,右手持玻片,将推片接近血滴处,然后轻轻接触血滴并压在血滴上,使血液呈“ ̄”字型展开,充满推片宽度。

3、将推片与载玻片形成30度夹角,用均匀的速度将血向载玻片的另一端推动。红细胞压积发生变化时,应适当的调整推片与载玻片的角度以及推动血液是的速度。标准的血涂片应做到头、体、尾分明,两边和两端留有空隙。

四、方法学评价:良好的血涂片是染色后血液形态学检查的提。薄血膜推片法用血量少、操作简单,是应用广泛的方法。某些抗凝剂可使血细胞形态发生变化,分类时应注意鉴别。根据不同的需要(如疟原虫)可采用厚血涂片法,阳性检出率高。

血涂片染色

1.瑞氏-吉姆萨混合染色能集合瑞氏染色与吉姆萨染色的优点。

2.染色方法:标记血涂片,将血涂片平放在染色架上,滴加A液覆盖整个血膜,30-1分钟后,滴加B液,将A、B液混匀,可用洗耳球轻吹液面,A、B液的比例为1:2,静置水平位置染色5-10分钟后,将载玻片拿起,轻轻晃动,使染料不再附着于血膜上。把水流调至小,平持载玻片,与水流方向呈90度,在血膜头部冲入,向血膜的尾端调整玻片的角度,直至染料冲干净,冲洗干净后的血涂片,放置在血片架上将水自然控干,或倾斜玻片等待自然干燥。

3.判断染色结果:在正常情况下,良好的染色结果为血膜外观为淡紫红色;低倍镜下,细胞分布均匀;细胞呈粉红色,少见染色颗粒,白细胞胞质能显示各类细胞的特有色彩,白细胞核染成紫红色。
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