DNA提取中各类试剂的作用
阅读次数:382 发布时间:2023/9/27 10:12:13
Tris-HCL:缓冲体系。提供稳定pH;
NaCl:可以降低DNA在水中的溶解度,并且不破坏DNA的结构;
EDTA: Ca2+ Mg2+ 的螯合剂,抑制DNase活性;
SDS:使蛋白变性,促进蛋白质和DNA的分离;
巯基乙醇:抗氧化剂,防止酚氧化成醌,保护DNA;也有人说可以用来消泡;
醋酸钾:钾离子置换SDS的钠离子,形成不溶于水的PDS,将大量蛋白同步沉淀下来。
氯仿:异戊醇:使蛋白变性。氯仿的作用是变性剂、抽提脂溶性物质;
异戊醇作用是A.降低表面张力、阻止气泡的产生;B.有助于分相(使离心后水相、有机相稳定)
(剧烈震荡时容易产生气泡,气泡会阻止相互间的充分作用);
异丙醇:沉淀DNA;
70%乙醇:洗涤DNA;(盐、蛋白等溶于70%乙醇,而DNA不溶)
100%乙醇:可以用于沉淀DNA,也可以用于使DNA快速干燥
Tris-HCL:缓冲体系。提供稳定pH;
NaCl:可以降低DNA在水中的溶解度,并且不破坏DNA的结构;
EDTA: Ca2+ Mg2+ 的螯合剂,抑制DNase活性;
SDS:使蛋白变性,促进蛋白质和DNA的分离;
巯基乙醇:抗氧化剂,防止酚氧化成醌,保护DNA;也有人说可以用来消泡;
醋酸钾:钾离子置换SDS的钠离子,形成不溶于水的PDS,将大量蛋白同步沉淀下来。
氯仿:异戊醇:使蛋白变性。氯仿的作用是变性剂、抽提脂溶性物质;
异戊醇作用是A.降低表面张力、阻止气泡的产生;B.有助于分相(使离心后水相、有机相稳定)
(剧烈震荡时容易产生气泡,气泡会阻止相互间的充分作用);
异丙醇:沉淀DNA;
70%乙醇:洗涤DNA;(盐、蛋白等溶于70%乙醇,而DNA不溶)
100%乙醇:可以用于沉淀DNA,也可以用于使DNA快速干燥