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支原体四种检测方法了解一下
阅读次数:388 发布时间:2023/10/17 10:37:21
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近日,全国多地医院出现较多肺炎支原体感染患者,支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型,它既不同于,也不同于病毒,是介于细菌和病毒之间,能在无活细胞的人工培养基上生长繁殖的小微生物。它广泛分布于自然界,与人类、 动植物的疾病有密切的关系。支原体的种类繁多,造成的危害非常广泛。目证明对人体有致病作用的支原体有肺炎支原体、 解脲支原体、 人型支原体、 生殖支原体等几种,但临床以肺炎支原体为常见。肺炎支原体主要以飞沫传播,引起儿童、 青少年呼吸道感染、 咽炎、 气管炎、 肺炎等。

支原体检测方法:

1、支原体的分离培养

它是支原体污染鉴定的金标准,准确,价格便宜。但支原体在分离培养的过程中,要长出明显克隆至少需要4周时间,所需时间较长。

2、ELISA方法

检测步骤复杂,出现误差的几率较高,对实验者操作技巧有要求。同时试剂盒成本较高,普遍不被选用。

3、DNA荧光染色法

它采用荧光染色剂Hoechst 33258和支原体DNA富含A-T的区域结合。价格适中。由于DNA检测需要将可疑样品与指示细胞共同培养,因此一般需要几天后才出结果。有假阳性和假阴性,需要与其他方法结合使用。

4、PCR技术

它根据支原体核糖体16s-23s rRNA的特异保守序列设计引物,对待检样本DNA进行扩增,通过对扩增产物的大小分析作出诊断。操作简单、速度快,只需2-3小时即可出结果,通量高,价格适中。但是,不同厂家生产的PCR检测试剂盒由于引物及内在设计的不同,其准确度和敏感度有天壤之别。用PCR方法检测支原体,其准确性与选择的试剂盒的质量有直接相关性。

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