培养基倾注温度小常识
阅读次数:407 发布时间:2024/5/13 11:03:39
培养基倾注温度小常识
1、培养基的倾注适宜温度约45℃。培养基放置于手心感觉不烫,但是放置于手背感觉烫时,培养基温度大约就是45℃。培养基倾注时温度太高的话,凝固时间较长,另外皿盖上会有大量冷凝水,不利于后续实验。温度太低则容易出现倒板过程中瓶中培养基部分凝固的现象。
2、有些培养基需要加入添加成分,这些添加成分在加入应先放置到室温,避免冷的液体造成琼脂凝结或形成片状物。
3、目多数实验室培养基灭菌后会放置水浴或者烘箱中,需使用的时候拿出来直接倒板。但培养基静置时间不宜过长,静置时间一般不超过4小时。静置时间过长,培养基中琼脂可能会少量凝固,形成类似絮状析出。
4、在实验过程中不可避免因特殊情况而导致未倒板培养基已凝固,凝固后培养基可重新加热溶解。一般来说沸水浴或者电磁炉加热,不能重新再灭一次菌。
培养基的倾倒方法主要涉及以下几个步骤:
1.温度调节。培养基倾注的适宜温度大约为45℃。如果温度过高,会导致凝固时间延长,且皿盖上会有大量冷凝水,不利于后续实验。如果温度过低,则可能导致倒板过程中瓶中培养基部分凝固。
2.添加成分。如果培养基需要加入添加成分,这些成分在加入应先放置到室温,以避免冷的液体造成琼脂凝结或形成片状物。
3.静置时间。培养基灭菌后应放置在水浴或烘箱中,使用拿出直接倒板。培养基的静置时间不宜过长,一般不超过4小时,以避免琼脂少量凝固。
4.平板准备。倒皿,平皿应保持在35℃~40℃的温度。如果需要表面接种,有冷凝水的平板表面容易产生蔓延菌落。这时可放在有对流的无菌净化台中吹干培养基表面,但不能过度干燥,否则培养过程中平板容易开裂。
5.倾注量。平板倾注量一般在18~20mL左右,如果培养时间超过48小时或培养温度高于40℃,为防止水分过量蒸发导致平板开裂,倾注量一般为25mL左右。
6.避免气泡。倒平板时尽量贴着平皿壁缓慢倒入,将气泡留在瓶子底部。如果平板中有少量气泡的话,可以把气泡轻摇到平板壁上,这样不会影响结果观察。
7.混合均匀。每个平板中加入10mL融化的琼脂培养基并迅速往复摇动和转圈晃动5~15次使培养基与接种物充分混合。
8.培养。待平板冷却后翻转并置于适当的温度下培养。
在整个操作过程中,需要注意避免污染,使用需将装有培养基的瓶子或试管弄松,然后放在滚水或蒸汽浴里进行溶解,要小心避免培养基过热变质。已消毒培养皿的数量要比所测样品的数量多一个做空白对照。