HRP-兔抗生物素

详细内容

产品名称：HRP-兔抗生物素

缓冲液成分：50%甘油、0.01M PBS、稳定剂、Proclin-300

标记物浓度：2mg/mL左右

使用建议：ELISA，WB建议在1：4000-20000选择合适您实验的稀释比例，也可根据您实验的具体情况在此建议的稀释度范围之外合理使用,如果您使用得当本产品可以稀释到数万倍后仍具有使用价值。稀释液推荐使用含0.2% BSA和0.05% 吐温-20的0.01M的PBS（PH：7.0），也可使用其它正确的稀释液，原则上配成的工作液要一次使用完，稀释后若需长期存放多次使用，请联系我们购买稳定剂或者商品化稀释液。

储存方法：请避光存放在-20℃。

有效期限：请查看管体标签，请您在管体注明有效期内使用。

注意事项：虽然本试剂在有效期过后很长一段时间仍可以使用，但还是强烈建议您在管体规定的有效期内正确使用。请不要在脏乱和强光环境中取用，以免造成污染和失效。如果一次使用很少可以将其适当分装后使用，这样可以有效的防止试剂因为频繁使用而造成污染。 请使用正确的稀释液，没有酶免基础知识的人员不得利用本产品做任何实验否则可能得到错误结果 。另外，此抗体仅用于科研，不用于诊断。


产品功能：
抗体的主要功能是与抗原（包括外来的和自身的）相结合，从而有效地清除侵入机体内的微生物、寄生虫等异物，抗体（antibody）是一种应答抗原产生的、可与抗原特异性结合的蛋白质。每种抗体与特定的抗原决定基结合。这种结合可以使抗原失活，也可能无效但有时也会对机体造成病理性损害，如抗核抗体、抗双链DNA抗体、抗甲状腺球蛋白抗体等一些自身抗体的产生，对人体可造成危害。


操作流程:
方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法：
1. 包被：用0.05M PH9.6 碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。
2. 加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。
3. 加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃孵育0.5～1小时，洗涤。
4. 加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。
5. 终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测O·D值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔O·D值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。
方法二 用于检测未知抗体的间接法：
用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml， 每孔加0.1ml，4℃过夜。次日洗涤3次。
加一定稀释的待检样品（未知抗体）0.1ml于上述已包被之反应孔 中,置37℃孵育1小时,洗涤。
同时做空白、阴性及阳性孔对照于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体（抗抗体）0.1ml， 37℃孵育30-60分钟，洗涤,zui后一遍用DDW洗涤。
其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。

原创作者：上海远慕生物科技有限公司

标签：HRP-兔抗生物素   

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