MDCK犬肾细胞

详细内容

细胞名称：MDCK犬肾细胞；MDCK
组织来源：肾细胞
培养条件：DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
形态：贴壁；上皮样；多角
细胞来源：1958年，MadinSH和DarbyNB从表观正常的成年雌性科克猎犬的肾建立了MDCK细胞株。角蛋白阳性。该细胞曾被用于研究β淀粉体蛋白的形成及其蛋白水解产物的分类。
产品用途：提供用于科研的稳定细胞系。
运输：冻存的细胞干冰运输，复苏的细胞冰袋运输。

MDCK犬肾细胞 培养方法：
收到细胞后，在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况：
如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，留10ml培养液继续培养。
如果细胞已长满（达80-90%）。即可进行传代，具体步骤如下：
a，弃去培养液，用PBS洗1-2次。
b，向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，吸取胰蛋白酶，加含有6ml 含10%血清的培养液，轻轻吹打细胞。
c，加入等量的的培养液，轻轻吹打混匀后吸出一半，分到新的培养
d，传代比例：1:2-1:3

温馨提示：培养瓶里面的培养液是加入高药物浓度的，为800ng/ml。我们采取缓慢增加药物的梯度的方法。具体步骤是，先加含200ng/mlTaxol药物的培养液，放入培养箱，这段时间会有小部分细胞悬浮起来，属于正常情况，通过换液可以去掉，等细胞待长满就可以消化传代了，这时可以一直用含药物培养液来消化培养细胞，一两代之后就可以将药物浓度提高到500ng/ml，两代后可以将药物浓度提高至高水平800ng/ml，含药物培养液用于细胞培养都没有问题，冻存的时候就不要在冻存液里加药物了。

MDCK犬肾细胞 保存和适用范围：
客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜原代细胞，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。

（MDCK细胞）犬肾细胞复苏的原则：
在实际操作中，冻存细胞要进行复苏，再培养传代。复苏细胞一般采用快速融化法。以保证细胞外结晶快速融化，以避免慢速融化水分渗入细胞内，再次形成胞内结晶损伤细胞。

原创作者：上海远慕生物科技有限公司

标签：MDCK犬肾细胞   

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