MDBK牛肾细胞

详细内容

　　细胞名称：牛肾细胞；MDBK

组织来源：肾细胞

培养条件：RPMI1640(W/oHepes)优质胎牛血清，10%

形态：贴壁；上皮细胞

细胞来源：1957年２月18日，S.H.Madin和N.B.Darby从一只表观正常的成年牛肾脏建立了MDBK细胞株。1973年这株MDBK细胞被牛病毒性痢疾病毒(BVDV)感染。1982年发现了一株未被BVDV感染的MDBK细胞株。这株细胞初来自ATCC1967年７月第96代的冻存管。这株MDBK细胞的后代经NVSL检测，未发现被任何病毒污染的证据。1982年８月，R.A.VanDeusen将其提供给ATCC时，已传代至第110代。这株细胞未被BVDV感染。

产品用途：提供用于科研的稳定细胞系。

储存方式：冻存的细胞干冰运输，复苏的细胞冰袋运输。

MDBK牛肾细胞 培养条件：

1、培养基：RPMI-1640培养基（不含Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%双抗+800ng/ml Taxol

2、温度：37.0°C

3、气体:空气 95%，CO2 5%

MDBK牛肾细胞  培养方法：

收到细胞后，在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况：

如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，留10ml培养液继续培养。

如果细胞已长满（达80-90%）。即可进行传代，具体步骤如下：

a，弃去培养液，用PBS洗1-2次。

b，向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，吸取胰蛋白酶，加含有6ml 含10%血清的培养液，轻轻吹打细胞。

c，加入等量的的培养液，轻轻吹打混匀后吸出一半，分到新的培养

d，传代比例：1:2-1:3

温馨提示：培养瓶里面的培养液是加入高药物浓度的，为800ng/ml。我们采取缓慢增加药物的梯度的方法。具体步骤是，先加含200ng/mlTaxol药物的培养液，放入培养箱，这段时间会有小部分细胞悬浮起来，属于正常情况，通过换液可以去掉，等细胞待长满就可以消化传代了，这时可以一直用含药物培养液来消化培养细胞，一两代之后就可以将药物浓度提高到500ng/ml，两代后可以将药物浓度提高至高水平800ng/ml，含药物培养液用于细胞培养都没有问题，冻存的时候就不要在冻存液里加药物了。

MDBK牛肾细胞 保存和应用：

客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜原代细胞，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。

原创作者：上海远慕生物科技有限公司

标签：MDCK犬肾细胞   

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