详细内容
产品名称：总胆固醇(TC)检测试剂盒(COD-PAP双试剂微板法)
规格：50T/100T
供应商:远慕生物
分类：生化检测
储存方式：4℃,避光,12个月
产品用途：用于人或动物的血清、血浆、脑脊液、细胞、组织等样本中的总胆固醇含量定量测定。
注意事项：又称胆固醇氧化酶法或胆固醇氧化酶-过氧化物酶偶联法等,血液中的胆固醇约1/3为游离胆固醇,2/3为与脂肪酸结合的胆固醇酯,后者被CEH水解为游离胆固醇,后者被胆固醇氧化酶(COD)氧化成胆甾烯酮,并产生过氧化氢,再经过氧化物酶(POD)催化,使4-氨基安替比林与酚(三者合称PAP)反应,生成红色醌亚胺色素(Trinder反应)。酶标仪在500~520nm处进行比色测定。
试剂注意事项：
①试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
②实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
③使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
④加入试剂的顺序一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
⑤按说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
总胆固醇(TC)检测试剂盒(COD-PAP双试剂微板法) 常见问题以及解决方法：
1、试剂的选择：选择优良试剂大家都是知道的，但是在检测之前还应该提前半个小时将试剂拿到常温下进行解冻；
2、加样中可能遇到的问题：在做血清或是血浆用于检测试剂的时候，会碰到血清血浆不好分离的情况，这个时候的解决办法是先放在常温中1到2小时，然后在进行离心处理；
3、洗板时容易造成误差： 因为洗板是人工洗的，所以判断什么时候洗干净了也是人为判断的，这个时候带有主观色彩，所以多清洗几次，还有就是在洗的时候孔与孔之间的液体容易交叉流动；
4、显色问题： 使用了过期的显色剂或者是显色剂用过后放置时间太长，都有可能造成显色剂不显色。所以在进行显色反应的时候，要先查看显色剂本身的情况；
5、终止反应：在加终止剂的时候由于倾倒速度快，差生气泡，造成假阳性结果。所以在倒终止剂的时候要缓慢倒；
6、读板：读板的时候首先应该保证板的清洁干净；
7、严格按照说明书操作。
总胆固醇(TC)检测试剂盒(COD-PAP双试剂微板法) 操作步骤：
1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50?l。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40?l，然后再加待测样品 10?l。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，
3.温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此 重复 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂 50?l，空白孔除外。
7.温育：操作同 3。
8.洗涤：操作同 5。
9.显色：每孔先加入显色剂 A50?l，再加入显色剂 B50?l，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15 分钟.
10.终止：每孔加终止液 50?l，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。
检测试剂注意事项：
1. 此试剂为体外检测试剂，效期内使用，试剂应视为传染物，不同总批号的试剂不能混用。
2． 使用前应将盒内各试剂取出。室温放置至少30分钟，
3． 浓缩洗涤液出现结晶后，请于37℃孵育15分钟。
4． 浓缩样品稀释液出现结晶后，请于37℃孵育15分钟
5． 若24小时内进行实验，标本可存放于2～8℃。不需及时实验，标本-20℃保存，避免反复冻融。
6． 在反复清洗微孔板，并扣干微孔中的残余液体，否则将降低精确度，造成吸光度偏离的假像。
7． 加样完毕后，应注意轻微摇动微孔反应条，以便使孔中的液体充分混匀。
8． 试剂盒保存于2～8℃，请勿冷冻，有效期请见盒内标示。
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原创作者：上海远慕生物科技有限公司
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